本報(bào)記者 張佳星

科技戰(zhàn)疫進(jìn)行時(shí)

　　“治療新冠病毒，亟須發(fā)現(xiàn)新的藥物?！?月2日，北京化工大學(xué)生物安全技術(shù)研究中心主任童貽剛對(duì)科技日?qǐng)?bào)記者表示，針對(duì)新冠病毒的藥物篩選必須在高生物安全等級(jí)的P3實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，這使得進(jìn)行試驗(yàn)的科研人員承擔(dān)著被感染的高風(fēng)險(xiǎn)，由于P3實(shí)驗(yàn)室資源有限，難以大規(guī)模開(kāi)展藥物篩選，延緩了抗新病毒藥物的研發(fā)。

　　高致病性的新冠病毒，有沒(méi)有可能找到“替身”？

　　3月2日，中華醫(yī)學(xué)雜志英文版刊發(fā)北京化工大學(xué)童貽剛團(tuán)隊(duì)研究論文《用相關(guān)病毒模型篩選抗2019新冠病毒的老藥》。該研究以另一種對(duì)人體無(wú)感染性、與新冠病毒S蛋白有92.2%同源性的病毒作為篩選抗新冠病毒藥物的替代模型。團(tuán)隊(duì)利用該模型篩選現(xiàn)有的2406種藥物，發(fā)現(xiàn)和驗(yàn)證了多種有效抑制冠狀病毒的老藥，部分藥物經(jīng)與新冠病毒的篩選模型比對(duì)，確認(rèn)了兩種模型的結(jié)果一致。

　　另一種早就發(fā)現(xiàn)的新冠狀病毒

　　“2017年，我們?cè)趶V西境內(nèi)一批死亡的走私野生穿山甲體內(nèi)找到了一種新的冠狀病毒，并將其分離出來(lái)，在新冠病毒的序列公布后，經(jīng)過(guò)比對(duì)，我們發(fā)現(xiàn)穿山甲冠狀病毒與新冠病毒的同源性比較高?！蓖O剛說(shuō)，這種病毒被命名為GX_P2V，研究發(fā)現(xiàn)它對(duì)人沒(méi)有明顯的致病性。

　　病毒的同源性包括基因組核苷酸序列的同源，也包括蛋白質(zhì)氨基酸序列的同源。在序列比對(duì)方面，穿山甲冠狀病毒與新冠病毒在氨基酸序列同源性方面超過(guò)90%的相似度。對(duì)于藥物篩選來(lái)說(shuō)，蛋白質(zhì)氨基酸序列的同源性越高，意味著病毒生命活動(dòng)的方式越相近，可以形象地理解為，兩個(gè)病毒的“行為方式”非常一致。

　　這種“行為方式”與新冠病毒極為相似的病毒，能不能替代新冠病毒用于藥物篩選呢？童貽剛敏銳地意識(shí)到：如果可以，那么“篩藥”工作將在針對(duì)新冠病毒的同時(shí)，也保障了實(shí)驗(yàn)的安全性，篩藥工作將走出高安全等級(jí)實(shí)驗(yàn)室，走進(jìn)普通P2實(shí)驗(yàn)室。

　　為了驗(yàn)證“替代”的可行性，童貽剛團(tuán)隊(duì)還驗(yàn)證了新病毒GX_P2V進(jìn)入細(xì)胞是否與新冠病毒使用同一道“門(mén)”——“Vero E6細(xì)胞是通用的病毒感染用細(xì)胞，ACE2是新冠病毒進(jìn)入細(xì)胞的蛋白受體，我們使用小干擾RNA（siRNA）介導(dǎo)的技術(shù)，使得感染用細(xì)胞上的ACE2沉默，看看GX_P2V是不是也以ACE2作為細(xì)胞受體。”童貽剛介紹，結(jié)果表明，GX_P2V也使用同一個(gè)細(xì)胞受體。

　　以上從序列對(duì)比、關(guān)鍵蛋白功能的研究和驗(yàn)證表明，冠狀病毒GX_P2V與新冠病毒高度相似，二者均以ACE2作為感染受體。以低致命性、高同源的冠狀病毒GX_P2V建立的藥篩平臺(tái)，可以進(jìn)行抗新冠病毒有效藥物的篩選。

　　替代新冠病毒，進(jìn)行藥物篩選驗(yàn)證

　　“替身”究竟能不能替代篩選？在實(shí)戰(zhàn)中見(jiàn)真章。

　　“受到病毒的感染，活細(xì)胞會(huì)發(fā)生形態(tài)的變化，例如變形、死亡……如果藥物能對(duì)病毒產(chǎn)生抑制作用，那么細(xì)胞的形態(tài)將不變?！蓖O剛說(shuō)，通過(guò)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，從細(xì)胞的外觀形態(tài)可判斷藥物的有效性。

　　此外通過(guò)實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）也可以實(shí)時(shí)測(cè)定在細(xì)胞體系中病毒RNA的濃度，如果抑制效果好那么病毒RNA的濃度就低。

　　為了驗(yàn)證新模型，研究團(tuán)隊(duì)篩選了2406種臨床批準(zhǔn)的藥物，研究它們對(duì)GX_P2X感染的Vero E6細(xì)胞病變的抑制作用。

　　“在已經(jīng)獲得臨床批準(zhǔn)的2406種藥物中，我們初步確定了幾種藥物的有效性，例如千金藤素、甲氟喹、塞拉菌素等?！蓖O剛說(shuō)，其中千金藤素處理后病毒濃度比未經(jīng)處理組低15393倍。

　　“相關(guān)藥物篩選出來(lái)之后，我們已經(jīng)在新冠病毒上進(jìn)行了驗(yàn)證，抗新冠病毒效果被再次確認(rèn)?！蓖O剛說(shuō)，這些結(jié)果表明，穿山甲冠狀病毒接近新冠病毒，用這種低致病性“替身”模型篩選出來(lái)的藥物，可以達(dá)到高效篩選抗新冠病毒藥物的效果。

　　“我們正在和其他很多的團(tuán)隊(duì)合作，篩選他們的一些有潛在抗新冠病毒效果的藥物?！蓖O剛介紹，由于無(wú)需P3實(shí)驗(yàn)室這樣嚴(yán)苛的實(shí)驗(yàn)條件，這一模型正在逐步地推進(jìn)應(yīng)用。

　　上述研究工作由童貽剛指導(dǎo)團(tuán)隊(duì)成員范華昊副教授、宋立華教授、安小平高級(jí)實(shí)驗(yàn)師、碩士生王立欽、博士生劉文麗、本科生劉振東共同完成。